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C4、C8、C18預(yù)裝反相色譜柱必須在至少含有5%有機(jī)溶劑的移動相中工作。在100%水溶液中，預(yù)裝色譜柱內(nèi)的填料很可能會發(fā)生脫水，也就意味著該移動相將在表面張力的作用下被填料微球的內(nèi)孔系統(tǒng)所排斥。在這種情況下，待分析樣品或多或少是路經(jīng)死體積被洗脫出來。并且，一旦移動相在色譜柱內(nèi)靜止時問題就會暴露出來。如果填料脫水現(xiàn)象已經(jīng)發(fā)生，在色譜柱上連續(xù)泵入40分鐘左右，有機(jī)溶劑含量至少達(dá)到50%的移動相，就可以使色譜柱狀態(tài)恢復(fù)到原來水平。
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