使用液相色譜柱比傳統方法簡單快捷
點擊次數:1546 更新時間:2019-11-25
液相色譜柱應用于藥物分析、衛生防疫、環境監測、農業、林業、漁業、畜牧業、制造業、石油化工、質量監督、教育研究、水利系統等領域。使用液相色譜柱比傳統方法簡單快捷,且所需樣品量少。
液相色譜柱是樣品組分在柱填料和流動相之間的質量交換,以達到分離的目的,因此流動相需要具備以下特性:
1、液相色譜柱的流動相對于樣品具有一定的溶解能力,確保樣品組分不會在色譜柱中沉淀(或長時間保留在色譜柱中)。
2、液相色譜柱的流動相和樣品之間不發生化學反應。
3、為了獲得良好的分離效果,流動相的粘度應盡可能??;降低色譜柱的壓降,延長泵的使用壽命(提高溫度可以降低流動相的粘度)。
4、流動相的物理和化學性質應與所用的檢測器相適應。如使用UV檢測器,使用對紫外吸收較低的溶劑配制。
5、流動相的沸點不應該太低,否則很容易產生氣泡,這將使實驗無法進行。
6、在制備流動相后,必須進行脫氣。除去溶解在流動相中的痕量氣體不僅有利于檢測,而且可以防止流動相中的痕量氧與樣品相互作用。
使用經驗:
一、柱頭型與不銹鋼毛細管接頭的匹配
液相色譜柱是消耗品,不是原始設備。有很多情況下,如果連接器和柱頭的深度不匹配,將會發生泄漏或過大的死體積。接頭的深度比柱頭的深度長,所以不容易擰緊和泄漏液體。接入深度比柱頭短,柱頭上有縫隙,導致死體積,峰帶變寬和峰拖尾。
二、溶劑的匹配轉換
如果儲存在液相色譜柱中的溶劑和儲存在儀器系統中的溶劑與流動相不匹配,則應在使用前進行轉化。特別是當流動相含有緩沖鹽時,如果色譜柱保存溶劑是純有機相或者有機相的比例高,色譜柱直接與儀器連接使用,將導致流動相進入色譜柱后,緩沖鹽結晶和沉淀,導致柱頭堵塞。建議經常使用緩沖鹽的儀器和色譜柱,使用5-10%的有機溶劑進行沖洗維護。