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Hypersil液相色譜柱是什么東西
點(diǎn)擊次數(shù):1520 更新時(shí)間:2021-05-12
  Hypersil液相色譜柱是什么?色譜是分離分析的一種手段,分離是核心,因此扮演分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的核心。色譜柱的要求是:柱的效率高,選擇性好,而分析的速度高。用于HPLC的市售各種顆粒填料為多孔硅膠,基于二氧化硅的鍵合相,氧化鋁,有機(jī)聚合物微球(包括離子交換樹脂),多孔碳等。粒徑通常為3、5、7、10um等。柱的理論值可以達(dá)到每米50,000至160,000。對于一般的分析,只需要5000個(gè)板就可以達(dá)到柱的效果;對于同源分析,僅500個(gè)就足夠了;對于更困難的分離物質(zhì)對,最多可以使用20,000柱。因此,柱的長度通常約為10到30cm,可以滿足復(fù)雜混合物分析的需要。
 
  柱的效率受柱的內(nèi)部和外部因素影響。為了獲得色譜柱的最佳效率,除了柱之外的死體積小之外,還需要一種合理的柱結(jié)構(gòu)(窮舉,可以減少填充床外部的死體積)和包裝技術(shù)。即使采用*填充技術(shù),柱中心的填充條件和沿管壁的零件始終是不同的。管壁附近的零件較松散,容易形成通道,流速較快,這會(huì)影響沖洗劑的流動(dòng)形狀。為了擴(kuò)大范圍,這就是管壁效應(yīng)。該管壁面積是從管壁內(nèi)部開始的材料直徑厚度的大約30倍。在一般的液相色譜系統(tǒng)中,柱外部效應(yīng)對柱效應(yīng)的影響遠(yuǎn)大于管壁效應(yīng)。
 
  色譜柱分為兩種:分析型和制備型
 
  ①常規(guī)分析柱(恒定柱),內(nèi)徑2~5mm,柱長10~30厘米;
 
  ②窄徑柱(內(nèi)徑),內(nèi)徑1~2mm,柱長10~20cm;
 
  ③毛細(xì)管柱,內(nèi)徑0.2~0.5mm;
 
  ④半制備的柱,內(nèi)徑>5mm;
 
  ⑤實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)備柱,內(nèi)徑20~40mm,柱長10~30cm;
 
  ⑥生產(chǎn)準(zhǔn)備柱內(nèi)徑可以達(dá)到幾十厘米。
 
  色譜柱的性能除了與固定相性能有關(guān)外,還與填充技術(shù)有關(guān)。在正常條件下,填料粒度>20um時(shí),干法填充制備柱較為合適;顆粒<20um時(shí),濕法填充較為理想。填充方法一般有四種:
 
  ①高壓勻漿法,多有用于分析柱和小規(guī)模制備柱的填充;
 
  ②徑向加壓法;
 
  ③軸向加壓法,主要用于裝填大直徑柱;
 
  ④干法,柱填充的技術(shù)性強(qiáng),大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室使用己填充好的商品柱。
 
  高效液相色譜柱的獲得,裝填技術(shù)是關(guān)鍵環(huán)節(jié),但根本問題還在于填料本身性能的優(yōu)劣,以及配套的色譜儀系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)是否合理。
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